高效液相色谱法测定——甘草中的甘草苷和甘草酸含量

作者:冉盛网 时间:2020-07-08 14:02:25

引言

       在中药里面,甘草的作用广泛,具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳的作用,是一种常见的镇咳祛痰药品。此外,甘草还具有清热解毒、通淋利尿的功能,能缓急止痛,还能起到对诸药的调和作用。

       本文参考《中国药典》2020 版第 一部,应用日立 Chromaster 高效液相色谱仪配紫外检测器,对甘草中的甘草苷和甘草酸含量进行了测定。

1. 仪器配置

       日立 Chromaster 高效液相色谱仪

       CM5110 泵 CM5260 自动进样器

       CM5310 柱温箱

       CM5410 UV 检测器

2. 色谱条件

       色谱柱:C18(5 μm), 4.6 mm × 250 mm

       流动相:A:乙腈;B:0.05%磷酸溶液

       流速:1 mL/min

       进样量:10 μL

       检测器:UV 检测器

       检测波长:237 nm

3. 实验结果

       使用 2中色谱条件分别对甘草苷和甘草酸对照品进行测定。其中,对照品甘草苷的浓度是 20 μg/mL,甘草酸的浓度是 200 μg/mL。下图 1、2 分别为甘草苷和甘草酸对照品连续进样的重叠色谱图,表 1 为对照品的保留时间和峰面积的重现性表格。

       从图 1、2 和表 1 可以看出,甘草苷和甘草酸对照品的峰型尖锐,保留时间和峰面积的重现性极好,RSD 均小于 1 %。

       然后,使用 2.中色谱条件分别对两个甘草片样品进行测定。下图 3、4 分别为甘草片样品 1 和样品 2 的重叠色谱图,表 2 为两个样品的保留时间和峰面积的重现性表格。

       从图 3、4 和表 2 可以看出,甘草片样品 1 和 2 中的甘草苷和甘草酸色谱峰分离度良好,可以和杂质峰完全分离,且峰型尖锐,保留时间和峰面积的重现性良好,RSD 均小于1 %。

4. 实验结论

       该实验使用 Chromaster 高效液相色谱仪,配有紫外检测器,对甘草中的甘草苷和甘草酸进行检测。该方法可以很好地分离和定量分析甘草中甘草苷和甘草酸两种成分,且色谱峰峰型尖锐,连续进样多次的保留时间和峰面积的重现性良好,对照品和样品的 RSD 均小于1%,完全能够满足中国药典的要求!